CITOFLUORIMETRIA
La facs facility offre ai ricercatori un servizio di citometria personalizzato, efficiente e affidabile.
Strumenti
- Due analizzatori FACScanto II, configurazione 3 laser (405, 488, 633) per l’analisi fino a 10 parametri.
- Un analizzatore BD FACSymphony, A5 configurazione 5 laser (355, 405, 488, 561, 633) per l’analisi fino a 30 parametri.
- Un cell sorter FACSaria III SORP, configurazione 5 laser (355, 405, 488, 561, 633) che consente di separare fino a 4 popolazioni contemporaneamente individuate sulla base di massimo 20 parametri.
- Un cell sorter FACSaria III, configurazione 4 laser (405, 488, 561, 633) che consente di separare fino a 4 popolazioni contemporaneamente individuate sulla base di massimo 14 parametri.
- Un cell sorter da banco MACSQuant® Tyto®configurazione 3 laser (405,488,633) situato in BLS3 che permette di selezionare le cellule ad alta velocità e con 10 parametri.
- Un separatore automatico Miltenyi Automacs, per la separazione magnetica su colonna in condizioni di sterilità.
I principali obbiettivi della facility sono:
- Effettuare un servizio di cell sorting per i ricercatori di INGM o per i collaboratori esterni.
- Effettuare sorting di cellule derivanti da donatori sani o da pazienti affetti da malattie non infettive (malattie infiammatorie, autoimmuni) da biopsie tumorali o organoidi
- Messa a punto, sviluppo e mantenimento di protocolli di base e avanzati per l’analisi citometrica e il cell sorting.
- Servizio di acquisizione e analisi per i ricercatori di INGM o per collaboratori esterni.
- Formazione e assistenza dei ricercatori di INGM per l’utilizzo in autonomia degli strumenti e per la preparazione ottimale dei campioni.
- Ricerca tecnica per lo sviluppo di protocolli avanzati di citometria a flusso.
- Collaborazione con i ricercatori di INGM dove siano richieste specifiche ed elevate competenze tecniche di citometria a flusso.
Le nostre competenze coprono le seguenti aree:
- Immuno fenotipizzazione e cell sorting di sottopopolazioni del sistema immunitario.
- Immuno fenotipizzazione e cell sorting di cellule staminali ematopoietiche.
- Immuno fenotipizzazione e cell sorting di cellule staminali mesenchimali.
- Cell sorting di specifiche popolazioni effettrici del sistema immunitario.
- Colorazione di superficie e intracellulare a colori multipli.
- Analisi del contenuto di DNA
- Saggi di proliferazione.
- Saggi di apoptosi.
Attività
- Messa a punto, sviluppo e mantenimento di protocolli di base e avanzati per l’analisi citometrica e il cell sorting.
- Servizio di cell sorting per I ricercatori di INGM o per collaboratori esterni
- Servizio di acquisizione e analisi per I ricercatori di INGM o per collaboratori esterni.
- Training e assistenza dei ricercatori di INGM per l’utilizzo in autonomia degli strumenti e per la preparazione ottimale dei campioni.
- Ricerca tecnica per lo sviluppo di protocolli avanzati di citometria a flusso.
- Collaborazione con I ricercatori di INGM ove siano richieste specifiche ed elevate competenze tecniche di citometria a flusso.
Team
Nome / Name | Ruolo / Role | |
---|---|---|
Mariacristina Crosti | Facility Manager | crosti@ingm.org |
Maria Lucia Sarnicola | Facility Assistant | sarnicola@ingm.org |
Pubblicazioni
- Recognition of viral and self-antigens by TH1 and TH1/TH17 central memory cells in patients with multiple sclerosis reveals distinct roles in immune surveillance and relapses.
Paroni M, Maltese V, De Simone M, Ranzani V, Larghi P, Fenoglio C, Pietroboni AM, De Riz MA, Crosti MC, Maglie S, Moro M, Caprioli F, Rossi R, Rossetti G, Galimberti D, Pagani M, Scarpini E, Abrignani S, Geginat J.
J Allergy Clin Immunol (2017) 140:797-808 - Extracellular MicroRNA Signature of Human Helper T Cell Subsets in Health and Autoimmunity.
Torri A, Carpi D, Bulgheroni E, Crosti MC, Moro M, Gruarin P, Rossi RL, Rossetti G, Di Vizio D, Hoxha M, Bollati V, Gagliani C, Tacchetti C, Paroni M, Geginat J, Corti L, Venegoni L, Berti E, Pagani M, Matarese G, Abrignani S, de Candia P.
J Biol Chem (2017) 292:2903-2915 - Transcriptional Landscape of Human Tissue Lymphocytes Unveils Uniqueness of Tumor-Infiltrating T Regulatory Cells.
De Simone M, Arrigoni A, Rossetti G, Gruarin P, Ranzani V, Politano C, Bonnal RJ, Provasi E, Sarnicola ML, Panzeri I, Moro M, Crosti M, Mazzara S, Vaira V, Bosari S, Palleschi A, Santambrogio L, Bovo G, Zucchini N, Totis M, Gianotti L, Cesana G, Perego RA, Maroni N, Pisani Ceretti A, Opocher E, De Francesco R, Geginat J, Stunnenberg HG, Abrignani S, Pagani M.
Immunity (2016) 45:1135-1147 - IL-10-producing forkhead box protein 3-negative regulatory T cells inhibit B-cell responses and are involved in systemic lupus erythematosus.
Facciotti F, Gagliani N, Haringer B, Alfen JS, Penatti A, Maglie S, Paroni M, Iseppon A, Moro M, Crosti MC, Stolzel K, Romagnani C, Moroni G, Ingegnoli F, Torretta S, Pignataro L, Annoni A, Russo F, Pagani M, Abrignani S, Meroni P, Flavell R, Geginat J.
J Allergy Clin Immunol (2016) 137:318-321 e5 - Dissection of the cord blood stromal component reveals predictive parameters for culture outcome.
Barilani M, Lavazza C, Vigano M, Montemurro T, Boldrin V, Parazzi V, Montelatici E, Crosti M, Moro M, Giordano R, Lazzari L.
Stem Cells Dev (2015) 24:104-14 - Reference proteome of highly purified human Th1 cells reveals strong effects on metabolism and protein ubiquitination upon differentiation.
Pagani M, Rockstroh M, Schuster M, Rossetti G, Moro M, Crosti M, Tomm JM.
Proteomics (2015) 15:3644-7 - IL-21 is a central memory T cell-associated cytokine that inhibits the generation of pathogenic Th1/17 effector cells.
Kastirr I, Maglie S, Paroni M, Alfen JS, Nizzoli G, Sugliano E, Crosti MC, Moro M, Steckel B, Steinfelder S, Stolzel K, Romagnani C, Botti F, Caprioli F, Pagani M, Abrignani S, Geginat J.
J Immunol (2014) 193:3322-31 - Human CD1c+ dendritic cells secrete high levels of IL-12 and potently prime cytotoxic T-cell responses.
Nizzoli G, Krietsch J, Weick A, Steinfelder S, Facciotti F, Gruarin P, Bianco A, Steckel B, Moro M, Crosti M, Romagnani C, Stolzel K, Torretta S, Pignataro L, Scheibenbogen C, Neddermann P, De Francesco R, Abrignani S, Geginat J.
Blood (2013) 122:932-42 - Identification of new hematopoietic cell subsets with a polyclonal antibody library specific for neglected proteins.
Moro M, Crosti M, Creo P, Gallina P, Curti S, Sugliano E, Scavelli R, Cattaneo D, Canidio E, Marconi M, Rebulla P, Sarmientos P, Viale G, Pagani M, Abrignani S.
PLoS One (2012) 7:e34395 - Distinct microRNA signatures in human lymphocyte subsets and enforcement of the naive state in CD4+ T cells by the microRNA miR-125b.
Rossi RL, Rossetti G, Wenandy L, Curti S, Ripamonti A, Bonnal RJ, Birolo RS, Moro M, Crosti MC, Gruarin P, Maglie S, Marabita F, Mascheroni D, Parente V, Comelli M, Trabucchi E, De Francesco R, Geginat J, Abrignani S, Pagani M.
Nat Immunol (2011) 12:796-803
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